二次接种采取二次接种措施，有利于草菇增产。草菇菌丝生长速度太快，极容易老化，导致生活力减弱，不能有效地利用培养料中的养分继续出菇。在第1潮菇采收后，撬松料面，并用石灰水泼湿，将培养料pH值调整在8~9；然后在料面撒播菌种，播后覆盖一薄层发酵过的培养料。也可在第1~2潮菇采收后，将料块翻过来，把底层培养料翻到表层，喷洒1%的石灰水，调整酸碱度。然后再在料面二次接种，接种量为2%~3%，一般可增产30%左右。
调酸碱度具体做法：向培养料喷洒3%的石灰水，不仅可补水，还可使培养料呈偏碱性；也可向培养料喷洒0.1%的尿素和麦麸水（100千克水加10千克麦麸，煮后过滤，取滤液50千克加清水50千克）。尿素用量为0.1%~0.2%，用量不可过多，否则容易产生鬼伞杂菌；或采用补施干牛粪和人尿。将干牛粪打碎，加入40%的人尿，混匀，使用前堆制1天，每采完一潮菇后施于料面上，若加入一些鸡、鸭粪，效果会更好。
实施覆土草菇覆土可提高培养料保湿性能和对温度变化的适应能力，使菇体肥大，减少死菇，增产幅度在20%以上。覆土材料可用菜园土（地表8~10厘米以下挖取），覆土厚度一般以2厘米为宜。
