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鲤科疱疹病毒Ⅱ型射阳株的分离与鉴定

时间 : 03-19 投稿人 : 蛋蛋 点击 :

疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)是第二个分离自鲤科鱼类的疱疹病毒,按照国际病毒系统分类委员会的命名规则命名为鲤科疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2),该病毒的核衣壳呈六角形或球形,直径100~110nm,有囊膜的病毒粒子呈椭圆形,直径为175~200nm,能导致金鱼及鲫急性病毒血症。目前,“鳃出血”病的危害日益严重,受到广大水产养殖研究人员的关注,关于该病的研究大都集中在对病毒的发现、患病鱼的特征描述等方面,对该病的深入研究很少。

2013年6月,江苏射阳地区某异育银鲫养殖鱼塘发病,前3d每天死亡500多尾,随后每天死亡1000尾以上。发病异育银鲫精神沉郁,腹部膨大、瘀血;在池塘边缘呈现黑色浮头,解剖后可见鳃瘀血、坏死;脾和肾肿胀,肝苍白,肠道空及上下颌充血,头盖、眼眶周围、鳃盖及鳍条基部都充血,肛门红肿。通威股份动物保健研究所技术人员对该地区患“鳃出血”病的异育银鲫病灶组织进行分离,通过回归感染试验、细胞分离鉴定、电镜观察以及PCR几种方法结合来鉴定。结果显示:健康异育银鲫注射组织滤液5d后开始发病,且症状与原发病症状一样,死亡率为80%,对照组没有死亡。对患病鱼内脏组织经超薄切片,电子显微镜观察发现组织内有大量的病毒颗粒,成熟的病毒粒子直径大小170~200nm,与疱疹病毒Ⅱ型病毒粒子相符。滤液经疱疹病毒Ⅱ型病毒特异性的PCR检测,获得阳性目的片段,同时将无菌处理的病样滤液接种胖头鲤细胞(FHM),培养1d后出现明显的细胞病变(CPE),单层细胞网状收缩,坏死细胞聚集。收集细胞培养液,进行病毒特异性的PCR检测,并检测到436bp的阳性片段。结果表明:从江苏射阳某“鳃出血”病异育银鲫养殖鱼塘分离到的病毒为疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)病毒。

鲤科疱疹病毒Ⅱ型射阳株的分离与鉴定

“鳃出血”病的罪魁祸首——CyHV-2病毒(电镜照片)

然而,针对由鲤科疱疹病毒II型(CyHV-2)引起的异育银鲫“鳃出血”病,世界范围内尚缺乏有效解决手段。基于鲤科疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)分离鉴定的理论基础,通威股份动物保健研究所牵头从抗病毒生理活性方向入手,构建高通量药物筛选模型,开发出预防控制“鳃出血”病的高活性绿色药物——体质调节剂。通过2014年在射阳地区生产试验研究及2015年股份公司华东鲫鱼重大流行病防治联合攻关项目的两次验证,体质调节剂成功将“鳃出血”病发病率降低10%以上、发病时间推后60天。体质调节剂的研发在解决“鳃出血”病的难题上率先取得突破,技术达到世界领先水平。

有关鲤科疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)分离鉴定的研究结果已在《淡水渔业》2015年第45卷第3期发表,第一作者为通威股份动物保健研究所李茂研究员。

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