[病例500]江苏省盐城市黄沙河镇一养殖池塘，面积60亩，2019年3月4日放2龄草鱼种1.1万尾（平均规格1.5斤/尾），此时池塘水深0.4米；11日，加水至1.0米，14日放2龄草鱼2.3万尾（平均规格1.5斤/尾）；17日放2龄草鱼2100尾（平均规格1.5斤/尾）；21日，加水至1.8米，24日放2龄草鱼4000尾（平均规格1.5斤/尾）；27日放2龄草鱼550尾（平均规格1.5斤/尾）；此外还放养银鲫5000尾（平均规格1.5两/尾），白鲢1.2万尾（平均规格1斤/尾），鳙鱼8000尾（平均规格1斤/尾）。配备6台3kW的叶轮式增氧机（见图1）。
3月26日，塘主发现有鱼游水，但没有发现死鱼；下午外用复合碘消毒。
3月27日，外用五倍子预防水霉病。
3月29日，上午用二硫氰基甲烷（一种消毒药）消毒，下午发现草鱼死亡17尾。该养殖池塘放鱼后，池塘水温低，鱼不吃料，一直没有投喂饲料。
3月30日，草鱼死亡51尾。开始用恩诺沙星、磺胺类抗菌药、免疫多糖和保肝护胆药物拌料进行投喂，投喂120斤。
3月31日，草鱼死亡113尾，继续投喂以上药物，拌饲料120斤。
4月1日，早上草鱼死亡50尾。上午9点到该养殖池塘调查。发病期间只死草鱼，鳙鱼、白鲢零星死亡，偶尔死亡1-2尾。测定水质指标：上层水溶解氧13.15mg/L，饱和度124%，水温13.5℃；下层溶解氧12.11mg/L，饱和度104%，水温13.5℃；pH值8.7，氨氮、亚硝酸盐测不出。
从塘边取5尾游水的病鱼，检查发病鱼烂身、烂尾，个别鱼头部发红；严重者肌肉完全溃烂穿孔（见图2-3），解剖鳃无明显异常（见图4），镜检鳃无虫，少数鳃丝挂脏。病鱼肝脏无明显病变、脾脏肿大发黑、肠道微红，无食（见图5）；后鳔严重充血（见图6）；肾脏肿大（见图7）。分别从5尾病鱼的溃烂处、溃烂处肌肉、肝脏和肾脏接种进行细菌分离培养；取脾、肾组织用95%酒精固定检测病毒；取溃烂处肌肉用波恩氏固定液固定做组织病理切片观察。
4月10日，电话回访，4日左右天气高温，死鱼大量增加，一天死鱼1000多尾，后来降温，死鱼减少，总共死鱼1万尾左右。整个发病过程只死草鱼，其它鱼不死。
结果：病鱼组织经实验室PCR检测草鱼出血病病毒（GCRV）呈阴性（见图8），对其它鱼类病毒如鲤疱疹病毒2型（CyHV-2）、锦鲤疱疹病毒（KHV）、鲤浮肿病毒（CEV）、野田村病毒（CMNV）、鲤春病毒血症病毒（SVCV）等进行检测也呈阴性。从病鱼接种胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）培养皿，室温（18℃）培养36小时，病鱼体表溃烂处、溃烂处肌肉中分离出大量圆形光滑、边缘整齐、灰白色、不透明的菌落，还有少量其它形态的菌落；肝脏和肾脏中未分离出细菌（见图9），挑取溃烂处和肌肉中分离的优势菌落，经16SDNA测序初步鉴定都为维氏气单胞菌（Aeromonasveronii）。对分离菌进行药敏试验，该分离菌对“出败康”、“代金康”、“肠苷康”、“菌炎好迪”等药物敏感（见图10）。组织病理切片结果显示病鱼肌肉组织病理切片可见组织坏死严重，多呈糜样，局部淤血、多细胞浸润，可见气泡（见图11）。
分析：1、维氏气单胞菌在水体环境中广泛存在，是一种条件致病菌，近几年对各种淡水鱼的危害明显增加，可引起体表溃烂和败血症等症状，严重时可以引起较高的死亡率，是一种对淡水鱼类危害较大的病原菌。本病例在溃烂处分离到大量维氏气单胞菌，是本病例致病菌的可能性非常大。
2、本病例病鱼肌肉组织病理切片可见较多气泡印迹，可能气泡病起到诱发发病或增加发病鱼死亡的作用，与发病期天气频繁剧烈变化有关。（利洋研究所一室雷燕戚瑞荣王小霞利洋水产药店黄沙河店李坤提供2019.05.16）
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