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胆红素、胆固醇、肝素常见生化药品的提取方法

时间 : 07-08 投稿人 : 涵雁 点击 : 加入收藏

胆红素、胆固醇、肝素常见生化药品的提取方法 | 养殖项目前景

一、胆红素
  利用猪胆汁提取胆红素,工序如下:
  1. 取新鲜胆汁用纱布过滤,除去杂质。
  2. 在盛胆汁的缸中加入澄清石灰水,石灰水量冬季为胆汁量的3.5倍,夏季为4倍。
  3. 把胆汁和石灰水充分搅拌后慢慢加热,温度升到50~60℃时,除去表面浮起的白沫。
  4. 当温度升到60℃时,开始出现胆红素钙盐小颗粒,当温度升到95℃时,液面就会浮起一层橘黄色的胆红素钙盐。
  5. 将胆红素钙盐从缸中捞出,再用细纱布过滤,然后将滤下的胆红素钙盐用热水冲洗干净。
  6. 将洗净的胆红素钙盐倒入盆中,再倒入相当于胆红素钙盐1倍量的水,研成糊状。
  7. 在胆红素钙盐糊中加入1%亚硫酸氢钠,并不断搅拌,随后缓慢滴加1∶1的稀盐酸,使pH值保持在1~2。
  8. 静置15分钟后,用细纱布滤去酸液,让其慢慢聚结成深红色的团块。
  9. 将少量浓度90%以上的酒精加入深红色的团块中,让团块溶解成糨糊状。
  10.在糊状物中加入10倍量浓度90%以上的酒精和0.5%亚硫酸氢钠,调整pH值到3~4,静置16小时。
  11.沉淀后,吸去上面的清亮液,将底部的沉淀物再用10倍量的酒精洗涤1次,即可得到粗制的胆红素。
  粗制的胆红素可交售给生化制品厂,再进一步加工为精制胆红素。
  二、孕马血清
  孕马血清(PMSG)在畜牧生产中应用广泛,它能促进母畜的卵巢功能恢复,诱发母畜发情和超数排卵,治疗公、母畜的性机能衰退,使猪、羊、兔等多胎多产,是提高养殖业经济效益的激素药物。
  孕马血清的提取方法:选取妊娠60~100天的健康母马(查明胎儿是马而不是骡),颈静脉采血,每次1000~2000毫升,将采集的血液盛于已经消毒、干燥过的长筒状玻璃容器中,然后置于温室中使其迅速凝固。为了更多地析出血清,可在血凝后压上一重物(如砝码)。一般每100毫升血液可析出45~50毫升血清,将析出的血清吸出,分装备用。如暂时不用,可以加入0.5%石炭酸防腐,放入冰箱,可保存一年不变质。
  三、胆固醇
  胆固醇是一种医药和化工原料,是人工牛黄的成分之一,可作为原料合成其他甾体化合物,如维生素D3等。
  从动物脑、脊髓中提取胆固醇,先将脑、脊髓制成干燥物,用丙酮选择性提取胆固醇。将丙酮提取液蒸发到近乎干燥,加入适量95%乙醇,加热使其残余物溶解,将此乙醇溶液放凉,胆固醇即结晶析出,再用酸水解或用碱皂化或水洗胆固醇粗结晶,除去黏附的磷脂质等,在95%乙醇中重结晶,最后把结晶置于70~80℃干燥器中除去水分即可。
  四、肝素
  肝素又称肝素钠,是以羊、猪小肠黏膜为原料提取制成的药物,具有抗血凝、防止血栓、治疗冠心病等功效,近年大量出口、售价很高。肝素生产设备比较简单,技术易为掌握,成本较低。
  1. 羊小肠黏膜提取肝素
  原料:十二指肠和部分空肠,长约40厘米,清水漂洗去污物,去除外层脂肪,绞碎(最好冻结后绞)成糜状。由于肠中总固体量较小,且有肠皮和断节小肠,纹碎度至关重要,与提取率密切相关。
  工艺流程:羊小肠黏膜→碱解→盐解→过滤→离子交换→洗涤→洗脱→沉淀→沉淀物→脱水→干燥→肝素粗制品。
  ①碱解、盐解。按羊小肠黏膜500千克计算,置于真空反应锅内,边搅拌边加食盐25千克,用30%氢氧化钠溶液将pH值调到9~9.5,升温到50~60℃,停止搅拌,保温1.5~2.0小时,再迅速升温到90~98℃,并间隔搅拌,保温15分钟。
  ②过滤。将上述提取液趁热过滤,弃去滤渣进行第二次提取,合并滤液并取样化验。
  ③离子交换。待滤液冷却到50℃时,调节pH值到8.5~9.0,按羊肠黏膜重量的7%加入D-254树脂,搅拌8~10小时。
  ④洗涤和洗脱。将以上交换液过滤,弃除滤液,用清水漂洗干净树脂,滤干,先用8%氯化钠液洗涤1次,后用7%氯化钠液洗涤3次,滤干后洗脱。第一次用23%~24%氯化钠液洗脱5小时,第二次和第三次各用23%~24%氯化钠液洗脱2小时。
  ⑤沉淀。将洗脱液缓慢加入1.2~1.5倍量的95%酒精,搅拌片刻,静置过滤,次日用虹吸法除去上清液,剩下的沉淀物用布氏漏斗抽干。
  ⑥脱水干燥。经抽干水的沉淀物用95%酒精和丙酮脱水,直到沉淀物干松为止。将干松的沉淀物置于真空干燥器内真空干燥5小时左右,即得到灰白色的粉末——肝素粗制品。
  2. 猪小肠黏膜提取肝素
  工艺流程:猪肠黏膜→提取→过滤→离子交换→洗涤→洗脱→酒精沉淀→肝素粗制品。
  ①提取。取新鲜肠黏膜投入反应锅内,加入3%氯化钠液,用30%氢氧化钠将pH值调到9.0,升温到50~55℃,保温2小时,再迅速升温到95℃,保温10分钟,然后冷却过滤。过滤用30目双层纱布。
  ②离子交换。待冷却到50℃时加入714型树脂(用量为2%),搅拌8小时后静置过夜。
  ③洗涤。次日虹吸除去上清液,收集树脂,水冲洗至洗液澄清、滤干,用2倍量的8%氯化钠液搅拌2小时、滤干,再用1倍量的8%氯化钠液搅拌2小时、滤干。
  ④洗脱。继续用2倍量的17%~18%氯化钠液搅拌洗脱8小时、滤干,再用1倍量17%~18%氯化钠液搅拌洗脱2小时、滤干。
  ⑤酒精沉淀。将滤液合并,加入等量的95%酒精沉淀、过滤,虹吸去上清液,收集沉淀,用丙酮脱水、干燥,即得肝素粗制品。
  (作者联系地址:河北省广平县综合职业教育中心 邮编:057650)

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