赢创德固赛（中国）投资有限公司动物营养业务线肖绪诚高俊
罗非鱼自身不能合成其生长所需的10种必须氨基酸（EAA），必须通过摄取食物补充以满足其生长发育的需要。目前，氨基酸的需要量研究通常选用剂量法来评估。但近年来，饲料营养素稀释法和缺乏法也被接受并应用于营养素需要量的研究中。本文就罗非鱼的必需氨基酸相关研究进行概述，以期对实际生产配方的制作起到指导作用。文中氨基酸需要量数据如无特别标注，数值均为总氨基酸需要量（%饲料）。
蛋氨酸和半胱氨酸
在罗非鱼饲料中，蛋氨酸通常为第一限制性氨基酸，在以豆粕为主要蛋白源的饲料中蛋氨酸缺乏最为严重。罗非鱼蛋氨酸需要量研究可以追溯到上世纪八十年代。Jackson和Capper（1982）研究发现，初始体重为1.7g的莫桑比克罗非鱼幼鱼（Sarotherodonmossambicus）的蛋氨酸需要量≤0.53%（含0.74%半胱氨酸），Santiago和Lovell（1988）报道，当饲料中半胱氨酸含量为0.15%时，尼罗罗非鱼仔鱼（62mg初始体重）的蛋氨酸需要量为0.75%。近年来，关于罗非鱼幼鱼总含硫氨基酸需要量（%饲料量）研究结果也有报道，例如：0.49%蛋氨酸（Nguyen和Davis，2009a）和0.85%总含硫氨基酸（Nguyen和Davis，2009b），0.91%蛋氨酸（0.10%半胱氨酸，干物质基础）（He等，2017）和0.99%总含硫氨基酸（Diogenes等，2016）。但也有许多研究表明，罗非鱼对蛋氨酸的需要量可能更高。例如：Xiang等（2014）报道68g尼罗罗非鱼饲料中总含硫氨基酸为1.43-1.46%（干物质基础）。赢创-塔克辛大学联合实验的结果表明，饲喂含1.25-1.57%总含硫氨基酸饲料的杂交罗非鱼（O.nilotics×O.mossambicus）体增重和体蛋白沉积最高（Figueiredo-Silva等，2015）。He等（2017b）也研究发现，饲喂0.99%蛋氨酸（含0.47%半胱氨酸）饲料的尼罗罗非鱼生长最好。
以上研究结果都是由剂量法获得的。Liebert（2009）选用饲料稀释法确定罗非鱼的蛋氨酸需要量，其研究表明，饲喂0.73%和0.94%蛋氨酸饲料的罗非鱼幼鱼可达到70%和80%理论最大氮沉积率。同时，为了达到上述实验预期，其饲料赖氨酸含量至少为2%（Xiang等，2014；Figueiredo-Silva等，2015；He等，2017a；He等，2017b）。然而也有研究指出，仅含1.50-1.67%的赖氨酸饲料即可满足上述研究中罗非鱼幼鱼的生长需要。但近年来的许多研究发现，饲料中1.50-1.67%的赖氨酸并不能满足罗非鱼幼鱼的生长所需（例如：2.32%，Takishata等，2009；≥1.8%，Bomfim等，2010），同时还会低估蛋氨酸的实际需要量。He等（2017b）研究发现，罗非鱼饲料中的能量含量不足也会低估其必需氨基酸的需要量。其结果表明，当饲料中的能值从10.9MJ/kg升高至12.4MJ/kg时，尼罗罗非鱼的蛋氨酸需要量（半胱氨酸0.47%）会从0.73%升高至0.99%。
近年来许多研究结果明确指出，在评估营养元素的需要量实验中，其实验饲料的必需营养素（包括氨基酸）是否平衡及饲料的能量水平都会直接影响最后的实验结果。综上，在满足赖氨酸需要量（2%）时，罗非鱼早期生长阶段的总含硫氨基酸需要量为1.4-1.6%。
赖氨酸
在关于罗非鱼必需氨基酸的研究中，赖氨酸的研究最为广泛。早在1982年，Jackson和Capper就发表过关于罗非鱼赖氨酸需要量的研究报告。该研究表明，莫桑比克罗非鱼幼鱼的最适饲料赖氨酸含量为1.62%。Santiago和Lovell（1988）报道的尼罗罗非鱼仔鱼（41mg初始体重）最适饲料赖氨酸含量为1.43%。Takishita等（2009）研究发现，饲喂含赖氨酸2.32%饲料（可消化赖氨酸含量为2.17%）的罗非鱼幼鱼（0.98g初始体重）增重率最高。然而，该研究的结果显著高于以往的研究数据。在之后的研究中发现，罗非鱼幼鱼（1.12g初始体重）（Bomfim等，2010）的体增重随饲料赖氨酸含量（1.05-1.80%）的升高而成线性增加关系，最适饲料赖氨酸含量最少为1.80%（可消化赖氨酸含量至少为1.7%）。但Furuya等（2012）使用二次回归方程计算得出，罗非鱼幼鱼（1.44g初始体重）最适饲料可消化赖氨酸含量仅为1.56%即可达到其最佳增重率。然而在该研究中，罗非鱼的特定生长率（SGR）仅为0.10g/天，显著低于其他研究报道中鱼体的特定生长率（0.38和0.47g/天）（Takishita等，2009；Bomfim等，2010），尽管这三个研究均选用初始体重相似的罗非鱼幼鱼（1g左右）作为研究对象。
以上研究结果都是由剂量法获得的，而Liebert（2009）和Diogenes等（2016）选用其它方法评估罗非鱼赖氨酸的饲料需要量。Liebert（2009）研究发现，评估尼罗罗非鱼幼鱼（12g初始体重）的赖氨酸需要量受很多因素的影响（鱼体的生长潜力，氨基酸的利用率和摄食率等）。研究者发现，在该实验条件的鱼体利用率下，饲喂含赖氨酸1.63%和2.09%饲料的罗非鱼即可达到70%和80%理论最大氮沉积率。Diogenes等（2016）采用营养物质缺乏法研究表明，尼罗罗非鱼幼鱼（20g初始体重）的赖氨酸需要量仅为1.56%。由于该研究的实验配方中其它必需氨基酸含量均低于罗非鱼的最适需要量，因此罗非鱼的实际赖氨酸需要量可能被低估了。关于罗非鱼成鱼赖氨酸需要量的研究鲜有报道。Michelato等（2016a）指出尼罗罗非鱼（275g）最适饲料赖氨酸含量为1.46%。
综上，尽管前文所述研究结果存在差异，但所报道的最适饲料赖氨酸含量（1.56-2.32%）均高于Santiago和Lovell（1988）报道的最适罗非鱼仔鱼饲料赖氨酸含量（1.43%）。这种差异可能是由于近年来研究的罗非鱼多为改良品系和全雄品系，这些品系相对于传统品系具有较高的生长速度。
苏氨酸
除蛋氨酸和赖氨酸之外，鱼类苏氨酸的研究也有大量研究报道。苏氨酸是机体蛋白质合成所需的必需氨基酸，它也在其它许多生理功能中起着重要作用，例如鱼体粘蛋白的合成和免疫反应。因此在商品饲料中，苏氨酸含量可以适当高于鱼体的实际需要量，特别是当养殖环境较差，鱼体遭受免疫冲击的时候。
Santiago和Lovell（1988）最先报道罗非鱼苏氨酸的需要量，该研究发现，尼罗罗非鱼幼鱼（初始体重小于1g）的饲料最适苏氨酸含量为1.05%。Liebert和Benkendorff（2007）和Liebert（2009）用饲料稀释法评估50g尼罗罗非鱼幼鱼的苏氨酸需要量发现，饲喂含有0.83%和1.05%的苏氨酸饲料的尼罗罗非鱼即可分别达到70%和80%的最大氮沉积率。而近年的研究表明，罗非鱼的苏氨酸需要量可能更高，例如罗非鱼幼鱼为1.33%（Yue等，2014）和1.45%（Diogenes等，2016），罗非鱼成鱼为1.62-1.72%（Zhou等，2014）和1.15-1.20%（Michelato等，2016b）。
在罗非鱼中，除蛋氨酸、赖氨酸和苏氨酸之外，其他必需氨基酸研究较少。表1总结了目前罗非鱼必需氨基酸相关研究的已发表数据。
现有数据的局限性
对现有已发表的研究数据综合分析发现：（1）相似体重（生长阶段）罗非鱼必需氨基酸需要量研究结果差异较大。这些差异可能由于实验鱼类因素（品系或年龄不同）、实验设计因素（评估方法和实验条件）、饲料因素（消化率，实验氨基酸的消化率，其他营养素平衡与否及饲料的质量）和实验选取的统计方法等因素之间的差异所导致；（2）近年来关于罗非鱼常见几种必需氨基酸的研究结果（Liebert，2009；Xiang等，2014；Figueiredo-Silva等，2015及He等，2017b关于总含硫氨基酸；Takishita等，2009和Bomfim等，2010关于赖氨酸的研究）均高于早年的研究报道结果。这可能是因为以往的实验中除待评估的氨基酸外，饲料中其它氨基酸含量未达到鱼体的需要量而导致该实验低估了待评价氨基酸的需要量；（3）关于罗非鱼可消化氨基酸需要量报道较少，大多数研究结果仅为总氨基酸需要量。在饲料配方设计中如果不考虑鱼类可消化水平的氨基酸需要量，仅参照鱼类对氨基酸的总体需要量来设计，这可能会导致鱼类对制配的饲料实际消化利用率较低，进而引起鱼体生长缓慢；（4）现有关于罗非鱼必需氨基酸的需要量研究多在其幼体阶段进行，但实际养殖过程中鱼类经过数月达到上市规格（700-1000克）。关于罗非鱼成鱼阶段的必需氨基酸需要量研究结果较缺乏，无法满足实际生产的需求；（5）目前广泛养殖的罗非鱼品系（如吉富品系）多为遗传性状改良后的罗非鱼，其生长速度较传统罗非鱼品系较快，具有较高的必需氨基酸需要量。
由于现有研究结果的缺乏，探讨不同生长阶段和不同养殖模式下罗非鱼对必需氨基酸的需要量显得尤为重要。
表1：罗非鱼必需氨基酸已发表的研究数据（%饲料）
*点击看大图。如无特别标注，本表数值均为%饲料含量；a鱼体增重；b饲料转化效率；c可消化基础；d杂交罗非鱼（O.nilotics×O.Mossambicus）
